बोवाइन क्षयरोग अँटीबॉडी एलिसा किट

तपशील

बीटीबी अब एलिसा

हेतू वापर: बोवाइन क्षयरोग प्रतिपिंडे एलिसा डिटेक्शन किट गोजातीय क्षयरोगाच्या निर्धारणासाठी आहे

व्हिट्रोमधील बोवाइनच्या मायकोबॅक्टीरियम बोव्हिसच्या सीरममध्ये अँटीबॉडी.

गोजातीय क्षयरोगाच्या संसर्गाचे मूल्यांकन करण्यासाठी चाचणीचा वापर केला जातो. या चाचणीत एमपीबी 70-एमपीबी 83 चिमेरा रिकॉम्बिनेंट लागू केले गेले.

नमुना: सीरम

आवश्यक सामग्री परंतु प्रदान केलेली नाही:

शुद्ध पाणी

पाइपेटर

96-विहीर मायक्रोप्लेट रीडर (450 एनएम)

टाइमर

सेंट्रीफ्यूज (4000 आरपीएम)

वॉशिंग मशीन

ओव्हन (37 डिग्री)

चाचणी प्रक्रिया आणि व्याख्या

चरण 1चाचणी प्रक्रिया

1.1 वॉश सोल्यूशन तयारी

Wऑर्किंग एकाग्रता wअ‍ॅशिंग लिक्विड:वापरण्यापूर्वी, वॉश सोल्यूशन खोलीच्या तपमानावर (20-25 डिग्री) पुनर्संचयित केले पाहिजे आणि ते एकसमान बनविण्यासाठी समान रीतीने हादरले पाहिजे. नंतर शुद्ध पाण्याने 20 पट एकाग्र वॉश सोल्यूशन (उदाहरणार्थ, 5 एमएल केंद्रित वॉशिंग सोल्यूशन 95 मिलीलीटर शुद्ध पाण्यात जोडले जाते), चांगले मिसळा आणि पातळ वॉशिंग लिक्विड 7 दिवसांसाठी 2-8 डिग्रीमध्ये साठवले जाऊ शकते.

1.2 नमुना तयार करणे

① संपूर्ण प्राण्यांचे रक्त 10 मिनिटांसाठी 4000 आरपीएमवर सेंट्रीफ्यूज केले गेले आणि सुपरनेटॅन्टंट गोळा केले गेले. सीरम हेमोलिसिसशिवाय नैसर्गिकरित्या देखील एकत्रित केले जाऊ शकते.

Cer सीरम नमुना 1: 100 सौम्य करा (198ul नमुना सौम्य मध्ये 2ul सीरम नमुना जोडा) आणि नख मिसळा.

टीप: नकारात्मक आणि सकारात्मक नियंत्रणे पातळ करणे आवश्यक नाही.

1.3 सजीवांच्या शरीरात निर्मार्ण होणारे द्रव्य संयुगे तयारी

सजीवांच्या शरीरात निर्मार्ण होणारे द्रव्य कंजूगेट 1: 200 (5ul एन्झाइम कन्जुगेट (एक्स 100) ते 995ul नमुना सौम्य जोडा) सौम्य करा आणि पूर्णपणे मिसळा.

1.4 चाचणी प्रक्रिया

Ane एंजाइम लेबल मायक्रोप्लेट घ्या (नमुन्यांच्या संख्येनुसार, वेगळे केले जाऊ शकते आणि बर्‍याच वेळा वापरले जाऊ शकते), एंजाइम लेबल मायक्रोप्लेटमध्ये पातळ सीरमचे 100ul जोडा, नकारात्मक आणि सकारात्मक नमुन्यांसाठी प्रत्येकी दोन विहिरी सेट करा आणि अनुक्रमे नकारात्मक आणि सकारात्मक नियंत्रणासाठी प्रत्येकी 100ul जोडा. प्लेटला कव्हर करण्यासाठी सीलिंग प्लेट फिल्मचा वापर करून विहिरीत हळूवारपणे नमुना हलवा आणि 30 मिनिटांसाठी 37 डिग्रीवर उष्मायन करा.

सीलिंग प्लेट फिल्म ओपन करा, प्लेटमधील द्रावण चांगले हलवा, प्रत्येक विहिरीमध्ये कार्यरत एकाग्रता वॉशिंग लिक्विडची 300µL जोडा आणि नंतर विहिरीत द्रव काढून टाका. वरील चरण 5 वेळा पुन्हा करा आणि शेवटी स्वच्छ शोषक कागदावर कोरडे पॅट करा.

प्रत्येक विहिरीला एंजाइम कंजूगेट 100µl, प्लेट झाकून ठेवा आणि 45 मिनिटांसाठी 37 डिग्री पर्यंत उष्मायन करा.

सीलिंग प्लेट फिल्म ओपन करा, प्लेटमधील द्रावण चांगले हलवा, प्रत्येक विहिरीमध्ये कार्यरत एकाग्रता वॉशिंग लिक्विडची 300µL जोडा आणि नंतर विहिरीत द्रव काढून टाका. वरील चरण 5 वेळा पुन्हा करा आणि शेवटी स्वच्छ शोषक कागदावर कोरडे पॅट करा.

Every प्रत्येक विहिरीसाठी 100µl सब्सट्रेट सोल्यूशन, प्लेट झाकून ठेवा आणि प्रकाशापासून 37 डिग्री अंतरावर 10 मिनिटे उष्मायित करा.

Each०µl प्रत्येक विहिरीवर समाधान थांबवा आणि experience मिनिटांत निकाल निश्चित करा.

चरण 2 निकाल व्याख्या

प्रत्येक विहिरीचे ओडी 450 मूल्य 96-विहीर मायक्रोप्लेट रीडरवर वाचले गेले.

2.1 प्रमाणीकरण

नकारात्मक नियंत्रणाचे सरासरी ओडी 450 एनएम मूल्य होते<0.5 and the average OD450nm value of positive control was ≥1, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 गणना पद्धत

प्रत्येक नमुन्यासाठी, दुरुस्त केलेले नमुना आणि नियंत्रण मूल्ये वापरून खालीलप्रमाणे एस/पीची गणना करा:

2.3 निकाल व्याख्या

जेव्हा एस/पी<0.25, it is judged as negative.

जेव्हा एस/पी 0.30 पेक्षा जास्त किंवा त्यापेक्षा जास्त असेल तेव्हा त्याचा सकारात्मक म्हणून न्याय केला जातो.

जेव्हा 0.25 एस/पी च्या तुलनेत कमी किंवा समान<0.30, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

हॉट टॅग्ज: बोवाइन क्षयरोग अँटीबॉडी एलिसा किट, चीन बोवाइन क्षयरोग प्रतिपिंड एलिसा किट पुरवठा करणारे, उत्पादक, फॅक्टरी